多聚磷酸對GFP相態(tài)轉(zhuǎn)變的影響,首 先
，分別觀測了LB培養(yǎng)基中表達了GFP的細菌與SMW培養(yǎng)基（低養(yǎng)分培養(yǎng)基）中細菌表達的GFP的狀態(tài)。
多聚磷酸廠家,
多聚磷酸價格。實驗結(jié)果顯示
，LB培養(yǎng)基中的細菌GFP均勻分散在菌體中
，而SMW培養(yǎng)基中的細菌蛋白發(fā)生了明顯的相分離，蛋白分別聚集于菌體的兩端
。由于兩種培養(yǎng)基中細菌內(nèi)多聚磷酸含量具有差異，因此設(shè)想這種相分離的發(fā)生與細菌內(nèi)部的多聚磷酸有關(guān)
。
接下來
，利用陽離子染料DAPI對細菌內(nèi)部的多聚磷酸進行染色
，發(fā)現(xiàn)在發(fā)生相分離的細菌體中
，GFP的綠色熒光點與多聚磷酸包裹的DAPI形成的黃色點發(fā)生重合，這則初步證實了多聚磷酸與蛋白的相互作用誘發(fā)了這種相分離行為
。
動態(tài)過程顯示，綠色熒光蛋白在濃度逐漸增高的多聚磷酸的作用下逐漸發(fā)生聚集
，最后在30分鐘時在細菌的兩端形成蛋白微液滴結(jié)構(gòu)
。進一步的實驗中
，通過逐漸調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的養(yǎng)分濃度來控制細菌內(nèi)的多聚磷酸含量
，結(jié)果在60分鐘時
，GFP依舊發(fā)生了聚集。而反過來
，逐漸提高培養(yǎng)基中的養(yǎng)分，原本聚集的GFP又分散開來
。以上現(xiàn)象充分證明了多聚磷酸對GFP的相分離起到了重要作用。
多聚磷酸含量對蛋白聚集的影響
隨后
，在菌體外進行了液-液相分離機理的研究。首 先
，發(fā)現(xiàn)未加入多聚磷酸的GFP溶液始終是澄清的
，而加入了多聚磷酸的GFP溶液隨時間推移發(fā)生渾濁
，顯微鏡下可以明顯觀測到在該溶液中存在蛋白小液滴。以此現(xiàn)象為基礎(chǔ)
，通過調(diào)節(jié)多聚磷酸的鏈長以及陰陽離子的比例(R-/+)來對多聚磷酸與蛋白的相互作用機理進行評估。實驗結(jié)果顯示
，多聚磷酸的存在對蛋白的相分離有明顯的促進作用；并且隨著多聚磷酸鏈長的增加
，蛋白相分離的驅(qū)動力變大，越容易發(fā)生蛋白的液-液相分離
；與此同時，電荷比對相分離現(xiàn)象也有明顯的影響
動態(tài)過程顯示，綠色熒光蛋白在濃度逐漸增高的多聚磷酸的作用下逐漸發(fā)生聚集
